顯微鏡觀察檢測魚病
對魚身上的寄生蟲觀測是檢測魚病的最要方法之一,一般采用鏡檢。用顯微鏡,解剖鏡,放大鏡對魚病進行檢測,簡稱鏡檢。鏡檢是在魚病情況比較復雜,僅憑肉眼不能作出正確診斷時而進行的更深層次的檢查。
當一尾病魚到手上時,須先檢查外觀,是否有異常之處,例如是否有出血或是有寄生蟲或是潰爛 .........等,翻開鰓蓋以肉眼檢查鰓絲,觀察是否有異狀,到目前為止是一般魚友都可以自己做的工作,這些也是檢驗病魚的最基本的工作。以肉眼觀察鰓絲后,剪下鰓絲以生物顯微鏡(新視窗顯微鏡效果更佳,可升級,總放大倍數(shù)可達到2000倍)觀察,通常由低倍率開始檢查是否有寄生蟲,或是做鰓絲抹片以染寄染色后以1000倍的由境觀察是否有大量異常的細菌出現(xiàn),但這只能作為參考,因為鰓絲上通常會有不少的細菌附著,因此很難斷定我們所觀察到的細菌就是引起疾病的病原。接下來將魚解剖觀察內臟器官是否異常,例如是否有腹水,肝臟或脾臟是否腫大或出血,腸道是否異常積水。外部觀察后接下來就是要采 疾病原菌了,在實驗室會將勾菌環(huán)燒紅冷卻后插入組織后劃于細菌用培養(yǎng)基上,不同器官皆要方開培養(yǎng),培養(yǎng)24小時后觀察是否有細菌生長,通常魚的病癥是細菌引起的可在培養(yǎng)基上看到很純的菌落 ,也就是細菌的顏色大小外觀都是一樣的,接下來就要鑑定細菌的種類了,因為只知道是細菌引起的是不夠的,細菌基本上分為陽性菌跟陰性菌,這兩類有不同的治療藥物,所以至少要搞清楚是陽性菌或陰性菌才能對癥下藥,接下來就是進行革蘭氏染色以鑑定細菌是陽性菌或陰性菌,一般的鰓部抹片或內臟的抹片都可以做此染色,知道細菌是陽性或陰性以后,就是做細部的確認細菌的種類,目前一般檢驗單位或實驗室都使用商業(yè)的鑑定套組,在實驗室常用的是API 20E,Microgen以及Biolog這三種鑒定系統(tǒng),這三種都是不同公司生產的快速鑒定系統(tǒng),當然鑒定系統(tǒng)有分腸內菌專用,陽性菌專用,陰性菌專用或是某類特殊菌屬專用的鑒定系統(tǒng),一般都可以鑒定到種,而也可以以傳統(tǒng)的生化特性來做分類, 依細菌的一些特性來做分類,但所花的時間較久也較麻煩,一般商業(yè)的鑒定系統(tǒng)約24小時就可知道結果,最慢的也只要48小時就可以知道所分離的細菌是什么菌了,當知道細菌的種類后,接下來就是做抗藥性試驗,這個試驗可知道哪些抗生素可用來抑制細菌,這個結果可以當做我們用藥的參考。
以上只簡略介紹最基本的數(shù)碼顯微鏡魚病檢驗流程,要證明引起該疾病的病源最好的結果是由病魚分離出來的病魚,在以人為方式感染健康的魚同樣可以引起相同的癥狀,這樣才能確定該病原是該病癥的病原菌,當然隨著研究者的領域會有不同的研究方向以及研究方法。
魚病發(fā)生的初期
(一)、感染的跡象。受侵害的魚在硬物體上摩擦,合攏鰭。皮膚上覆蓋著發(fā)白的藍色不透明體,尤其是在關部和背鰭之間。如果鰓部受到侵害,呼吸的頻率顯著加快。在感染的晚期,皮膚表面腫脹然后脫落。
(二)、感染詳述。斜管蟲是纖毛蟲,一種單細胞的、只有用魚病檢測顯微鏡才能看得見的生物體,不均勻地覆蓋著茸毛,茸毛推動蟲體在水中前進。使用中等倍數(shù)顯微鏡能看到斜管蟲,但是必須迅速采到標本,因為斜管蟲在魚死后兩小時之內就離開了魚體。這種寄生蟲首先侵襲受了傷的魚,但是在擁擠的環(huán)境條件里傳染到健康的魚。斜管蟲病使魚變得非常弱,嚴重的病例能對鰓造成長久的損傷。斜管蟲靠細胞分裂繁殖。
(三)、推薦的治療方法。如果魚比較強壯,對淡水魚類最好的治療方法是用3%的鹽水浸泡,讓魚呆在里面直到它們蜷縮起來,然后迅速地把它們放回到它們自己的水族箱里。作為一種替代并且刺激性小治療方法,是將魚放入1%的鹽水中待10-15分鐘,然后把魚放回干凈的水里,治療熱帶魚溫度最好在28-30度?;蛘呖梢允褂眯滦涂辜纳x處理劑。如果寄生蟲留在沒有魚的、溫度在30度的水族箱里大約5天,它們就會死亡。但是還必須治療魚體上的寄生蟲。
在用顯微鏡對病魚進行檢測時的注意事項:
要用活的病魚或剛死的病魚進行檢查。由于魚死亡后,寄生蟲很快隨之死去,寄生于魚體的病原體又非常微小,死后往往很快改變形狀或腐爛分解,因此時間稍長就很難確定其病原體。
取樣時要保持病魚魚體濕潤。因魚體干燥后,寄生在病魚體表的寄生蟲會同時被干掉,甚至連病魚的癥狀也會變得不明顯或無法辨認。因此,應將病魚裝在帶有原飼養(yǎng)水的桶或盆里拿出檢查。
顯微鏡做魚病檢查時的詳細方法:
載玻片法適用于低倍率或高倍率魚病檢測顯微鏡檢查。方法是取下一小塊病灶組織或一小滴內含物,放在干凈的載玻片上,滴入一小滴清水或鹽水,蓋上蓋玻片,輕輕地壓平,先在低倍率顯微鏡下檢查,分辨不清或可疑的可再調到高倍率下檢查。
一般幾十微米大小的寄生蟲(如鞭毛蟲)用高倍率檢測,幾百微米的寄生蟲(如車輪蟲)用低倍率檢測。
玻片壓縮法 用兩片厚度約為3~4毫米,大小約6 x12厘米的玻片,先將要檢查的組織或者是器官的一部分以及粘液等,放在其中一片玻片上,滴上適量的清水或鹽水(注意體表部分或粘液用普通水,體內器官或組織用0.56%的鹽水),用另一片玻片將其壓成透明的薄層,即可放到低倍顯微鏡下檢查。
應該重點檢查的組織器官 魚的各個組織器官、血液都可能有病原體的寄生,但在生產實踐中,特別應該重點檢查的部位是粘液、鰭條、鰓、腸胃、肝臟。
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