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顯微鏡觀察檢測細胞活細胞對光線是透明的,光線通過活細胞時,波長和振幅幾乎沒有改變,所以用普通光鏡無法看清未經(jīng)染色的活細胞。20世紀30年代 荷蘭 Zernike 相差顯微鏡觀察活細胞的步驟如下(1)調整好相差顯微鏡(2)觀察瓶皿準備(3)調光; 細胞的生長狀態(tài)生長良好的細胞,在顯微鏡下可觀察到細胞透明度大,折光性強,輪廓不清。 若細胞生長狀態(tài)不良,可見細胞輪廓增強,細胞折光性變弱,細胞胞質中出現(xiàn)空泡、脂滴和其他顆粒狀物質,細胞之間空隙增大,細胞形態(tài)不規(guī)則,甚至失去原有細胞的特點,產(chǎn)生圓縮脫落,有時細胞表面及周圍出現(xiàn)絲絮狀物。
各種細胞及各代細胞增殖的時間不盡相同。 一旦發(fā)現(xiàn)細胞長滿瓶底80%就應及時傳代,否則會影響細胞生長甚至脫落。
注意事項
活細胞的觀察檢測方法 1、暗視野顯微鏡技術觀察活細胞
原理:利用特殊聚光器使光線不能進入物鏡,經(jīng)過標本的散射光線使物鏡被放大,因此在黑暗背景中可呈現(xiàn)明亮的像。 優(yōu)點:反差增大,分辨率提高,可觀察到5nm的微小質點。 應用:觀察活細胞內的細胞核、線粒體、細菌和霉菌等。 2.縮時顯微攝影術觀察 優(yōu)點:可直接記錄活細胞的連續(xù)動態(tài)變化過程,能非常直觀地展現(xiàn)細胞生長過程中的動態(tài)變化,如細胞運動、細胞分裂、細胞膜變化、細胞死亡等過程。 3.體外活細胞染色觀察 體外活細胞染色就是在體外培養(yǎng)條件下,用某種染料對活細胞進行染色,而不影響活細胞生命活動的一種方法。利用這種方法,可以對培養(yǎng)物進行染色觀察,經(jīng)染色的培養(yǎng)物還可以繼續(xù)進行培養(yǎng)。 文章出自:科信儀器 轉載時必須以鏈接形式注明作者和原始出處及本聲明。
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